Augmentation de la productivité de la réaction IVT par chromatographie HPLC

Jun 15, 2023

Ce que nous bcast caractéristiques:Rok Sekirnik, PhD, responsable du développement des procédés ARNm/ADNp, BIA Separations, maintenant une société Sartorius.

Les réactions de transcription in vitro (IVT) sont normalement effectuées par lots. Compte tenu de leur base catalytique, il est possible d'allonger les temps de réaction et les rendements en ajoutant en continu des réactifs consommés au mélange réactionnel. Cependant, les stratégies de fed-batch rapportées à ce jour n'ont réussi qu'à atteindre une augmentation de 40 à 100% de la production d'ARNm. L'une des principales limites du développement a été le faible débit d'analyses pour la quantification des précurseurs d'ARNm et de NTP ; la productivité est généralement déterminée comme une mesure finale de la concentration d'ARNm.

Dans ce webinaire, nous discuterons d'une méthode analytique basée sur HPLC utilisant un ligand multimodal basé sur un échange d'anions/ligand de liaison hydrogène (PrimaS) pour surveiller la réaction IVT, qui permet la quantification simultanée des NTP, du réactif de coiffage, du plasmide et de l'ARNm. dans les 3,5 minutes.

Lorsqu'elle est appliquée à la surveillance de la réaction IVT, une approche discontinue avec une productivité moyenne de 3 à 5 mg/mL peut être convertie en batch alimenté produisant 10 à 12 mg/mL. Deux approches pour contrôler la réaction IVT seront démontrées, l'une se concentrant sur la productivité de l'ARNm non coiffé, l'autre sur la productivité de l'ARNm coiffé, nécessitant ainsi un contrôle précis du rapport NPT/réactif de coiffage.

Remplissez simplement le formulaire ci-dessous pour regarder le webcast enregistré maintenant.

Catégories : Demandez aux experts, En aval, Contenu sponsorisé, Webinaires