Recherche sur l'isolement et l'identification de la maladie des points noirs de Rosa chinensis à Kunming, Chine

Oct 24, 2023

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 8299 (2023) Citer cet article

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Grâce à une enquête sur les maladies des roses dans le jardin tropical du sud de Kunming, en Chine, il a été constaté que la tache noire était la maladie la plus courante et la plus grave des roses cultivées en plein air là-bas, avec une incidence de plus de 90 %. Dans cette étude, l'isolement du champignon a été réalisé sur des échantillons de feuilles de cinq variétés de roses sensibles aux taches noires du jardin tropical du sud par isolement tissulaire. 18 souches de champignons ont été initialement obtenues, et sept d'entre elles ont finalement été identifiées comme provoquant des symptômes de taches noires sur des feuilles saines de rosier après vérification par la règle de Koch. En observant la morphologie des colonies et des spores, et en construisant un arbre phylogénétique en combinant biologie moléculaire et gènes multiples, deux champignons pathogènes ont été identifiés, à savoir, Alternaria alternata et Gnomoniopsis rosae. G. rosae a été le premier champignon pathogène de la tache noire du rosier isolé et identifié dans cette étude. Les résultats de cette étude peuvent fournir une base de référence pour de nouvelles recherches et le contrôle de la maladie des points noirs du rosier à Kunming.

La rose est l'une des fleurs les plus célèbres et les plus populaires, la Chine est le berceau de la Rosa chinensis. Elle s'est propagée de la route de la soie à la Perse, à Ceylan et à d'autres pays avant le XIIe siècle, et a été très appréciée et aimée à l'étranger en tant que espèces endémiques pour l'échange culturel1. En Chine, la rose est définie comme la fleur de la ville par plusieurs villes et est largement utilisée dans l'aménagement paysager urbain, mais dans le processus de plantation et de croissance, elle est vulnérable aux maladies et aux insectes, entraînant une croissance médiocre, la chute des feuilles, le flétrissement et même la mort, qui affecte à la fois l'ornement et réduit la valeur économique de la rose elle-même2. Il existe dix espèces de maladies des roses signalées, dont sept sont fongiques : oïdium, tache noire, mildiou, moisissure grise, moisissure des feuilles, rouille et la brûlure des branches, respectivement, parmi elles, la tache noire est la plus grave et est devenue une maladie mondiale, qui survient couramment dans la plupart des zones de plantation de roses, en particulier dans les cultures en plein champ avec une incidence très élevée3.

La tache noire de la rose a été signalée pour la première fois en Suède en 18154. À l'heure actuelle, la maladie de la tache noire de la rose se produit dans toutes les régions du monde et est devenue un problème important à résoudre de toute urgence dans la production de rose. Selon des études antérieures, il existe deux espèces d'agents pathogènes qui causent la tache noire dans la rose : l'une est Marssonina rosae et l'autre est Alternaria sp.5. Abbas a signalé pour la première fois au Pakistan que les champignons pathogènes responsables de la tache noire de la rose étaient principalement l'Alternaria sp. .6.En 2013, Xu et al. a collecté 15 échantillons de feuilles de rose présentant des symptômes typiques de taches noires à Xi'an, Xianyang, Baoji et Weinan, et a identifié les champignons pathogènes infestant la tache noire comme Marssonina rosae après isolement et purification7. Feng et al. collecté des feuilles malades de rose présentant des symptômes de taches noires dans le jardin du Yuncheng College, après identification morphologique et analyse phylogénétique moléculaire, le champignon pathogène responsable de la tache noire de la rose était Alternaria alternata8.

Le but de cette étude était d'identifier avec précision deux champignons pathogènes isolés des feuilles atteintes de taches noires de cinq variétés de roses dans le jardin tropical du sud à Kunming, en Chine, grâce à l'identification morphologique et à l'analyse phylogénétique de biologie moléculaire combinée à la détermination de la pathogénicité, ce qui peut fournir un base théorique pour des recherches ultérieures sur les caractéristiques biologiques des agents pathogènes de la tache noire de la rose ou pour un contrôle efficace de la maladie de la tache noire de la rose à l'avenir.

En novembre 2021, nous avons effectué une enquête sur les maladies des roses dans quatre zones du jardin tropical du sud à Kunming, en Chine, qui couvre une superficie d'environ 5 acres. Les symptômes de ces maladies des points noirs sont similaires. Cinquante échantillons de feuilles de cinq variétés de roses ("Red Leonardo da Vinci", "Sweet Pretty", "Happy Carefree", "Benita" et "Home run") présentant des symptômes évidents de tache noire ont été collectés (dix échantillons ont été collectés pour chaque variété ), et ramené au laboratoire pour stockage à 4°C au réfrigérateur. Cinq variétés de roses étaient gravement infectées par la tache noire et l'incidence de chaque variété était supérieure à 80 %.

Milieu : milieu gélosé au dextrose de pomme de terre (PDA) : pomme de terre 200 g, glucose anhydre 20 g, gélose 17–20 g, eau distillée 1 L.

Réactifs : Kit d'isolement d'ADN génomique de champignons rapides de Sangon Biotech, amorces PCR (ITS1/ITS4, NS1/NS4, LSU1Fd/LR5, EF1-728F/EF1-986R, T1/T2), 2 × Taq PCR Mix, colorants d'acide nucléique, ADN Marqueur DL2000, 5xTAE, etc.

Instruments : microscope optique, autoclave, bain de métal à température constante, centrifugeuse à basse température, instrument PCR, instrument d'électrophorèse d'imagerie sur gel, incubateur à température et humidité constantes, etc.

L'isolement tissulaire9 a été utilisé pour isoler des échantillons de feuilles de rose présentant des symptômes évidents de tache noire. Après avoir rincé les feuilles de rosier malades, découper à l'aide d'un scalpel stérilisé des morceaux de tissus de 3 × 3 mm à la jonction des feuilles malades et saines dans le banc ultra-propre, puis mettre ces tissus dans une solution d'hypochlorite de sodium à 1 % (5 s), Alcool à 75 % (30 s), enfin rincer à l'eau stérile trois fois, déposer sur papier filtre stérilisé, sécher puis les inoculer sur le milieu PDA avec une pince. Trois blocs de tissus ont été inoculés dans chaque boîte de Pétri, marqués du numéro et de la date sur le couvercle, scellés et incubés dans un incubateur à température et humidité constantes à 25 ℃. Trois groupes de témoins parallèles ont été utilisés pour chaque expérience. Après 2 jours, les colonies ont été cultivées et immédiatement purifiées, après purification 2 à 3 fois pour obtenir une culture pure, inoculez-la sur une inclinaison de tube à essai PDA, mettez-la dans un incubateur à température constante de 25 ℃ pour attendre que les colonies se développent pleines de milieu, mettez au réfrigérateur à 4 ℃ pour être réfrigéré.

inoculation de feuilles ex vivo : des feuilles saines de cinq variétés de roses ("Red Leonardo da Vinci", "Sweet Pretty", "Happy Carefree", "Benita" et "Home run") ont été récoltées dans le jardin tropical sud de Kunming, en Chine, en Mai 2022. Les feuilles de rose saines ont été rincées à l'eau du robinet, puis désinfectées avec de l'alcool à 75% pendant 30 s, puis rincées à l'eau stérile trois fois et placées sur du papier filtre stérile pour sécher. Les blocs fongiques ont été poinçonnés au bord des colonies avec un poinçon stérilisé de 5 mm de diamètre et mis de côté. Deux couches de papier filtre stérile ont été placées dans une boîte de Pétri de 9 cm de diamètre et humidifiées avec de l'eau stérile, les feuilles de rose saines stérilisées ont été placées sur le papier filtre, une feuille composée a été placée dans chaque boîte de Pétri, des plaies peu invasives ont été faites sur le petites feuilles avec un scalpel stérilisé, puis un bloc mycélien de 5 mm a été inoculé sur la plaie et le site d'inoculation a été recouvert d'une boule de coton humide stérile, trois petites feuilles ont été traitées avec chaque feuille composée, et une inoculation témoin (inoculée avec un 5 bloc PDA de mm de diamètre) a été mis en place, et chaque groupe expérimental a été répété trois fois. Après inoculation, les boîtes de pétri ont été scellées avec du film alimentaire et placées à température ambiante, lorsque des symptômes sont apparus sur les feuilles, elles ont été enregistrées et photographiées immédiatement.

Inoculation dans des feuilles vivantes : les variétés correspondantes de boutures de rose avec une taille de feuille relativement constante ont été sélectionnées, et les surfaces des feuilles de rose saines ont d'abord été désinfectées avec des boules de coton écrémées trempées dans de l'alcool à 75 %, puis les feuilles ont été trempées dans de l'eau stérile et essuyées trois fois. fois, et les parties à inoculer ont été piquées avec des aiguilles d'inoculation stériles, puis un bloc mycélien de 5 mm a été inoculé sur la plaie et le site d'inoculation a été recouvert d'une boule de coton humide stérile, trois répétitions ont été traitées pour chaque variété de rose, trois petites les feuilles ont été traitées pour chaque feuille composée, et mis en place une inoculation témoin (inoculée avec un bloc PDA de 5 mm de diamètre), et recouvert les feuilles composées entières inoculées avec des sacs en plastique, observés et enregistrés quotidiennement et pulvérisé de l'eau pour humidifier les feuilles inoculées. Après l'apparition des symptômes, enregistré et photographié immédiatement.

Selon la règle de Koch, les tissus des feuilles de rose à la jonction des malades et des sains ont été à nouveau prélevés pour isolement et purification, les souches ré-isolées ont été comparées aux souches d'origine et la même méthode d'identification que les souches d'origine a été utilisée pour tester si elles étaient compatibles avec le champignon pathogène d'origine.

Le champignon pathogène de la tache noire rose a été inoculé sur un milieu PDA et incubé à 25 ℃ pendant 7 à 10 jours. La morphologie, la couleur et le taux de croissance des colonies ont été observés et enregistrés. Les lames ont été préparées en prélevant du mycélium avec une aiguille d'inoculation, et les caractéristiques morphologiques telles que le mycélium, la couleur, la structure productrice de spores, les conidies ont été observées au microscope optique et photographiées et enregistrées.

Les champignons pathogènes ont été inoculés sur du milieu PDA et incubés pendant 7 jours, après que le mycélium ait poussé sur toutes les boîtes, l'ADN génomique total des souches testées a été extrait et l'amplification par PCR a été réalisée à l'aide des amorces universelles fongiques ITS(ITS1/ITS4) , SSU(NS1/NS4), LSU(LSU1Fd/LR5), TEF(EF1-728F/EF1-986R) et TUB(T1/T2) (tableau 1). Le système réactionnel est présenté dans le tableau 2 ; la procédure de réaction d'amplification par PCR est présentée dans le tableau 3. Les produits de PCR amplifiés ont été détectés par électrophorèse sur un gel d'agarose à 1 %, et s'il y avait des bandes simples et claires, ils ont été envoyés à Biotech Bioengineering Ltd. pour séquençage. Les résultats de séquençage ont été analysés par comparaison de séquences sur le site Web du NCBI à l'aide de l'outil BLAST, et en référence à Muhammad Farhan10 et Ning Jiang11, les séquences connues à forte homologie dans GenBank ont ​​été recherchées en ligne en tant que souches modèles. Sur la base des séquences de plusieurs combinaisons de gènes de rDNAITS, SSU, LSU, TEF1 et LSU, l'arbre phylogénétique a été construit à l'aide de la méthode du maximum de vraisemblance à l'aide du logiciel MEGA11.0 pour analyser la parenté des souches pathogènes de points noirs de rose avec le modèle souches et enfin déterminer leur statut taxonomique12,13.

Les études expérimentales et les recherches de terrain sur les plantes (cultivées ou sauvages), y compris la collecte de matériel végétal, doivent être conformes aux directives et législations institutionnelles, nationales et internationales pertinentes. Nous respecterons strictement la Déclaration de politique générale de l'UICN sur la recherche sur les espèces menacées d'extinction et la Convention sur le commerce des espèces de faune et de flore sauvages menacées d'extinction. Tous les spécimens ont été collectés avec la permission du South Tropical Garden, Kunming. Nous confirmons la conformité avec la politique de l'UICN pour les plantes.

Grâce à l'enquête sur la maladie des roses dans le jardin tropical du sud de Kunming, en Chine, il a été constaté que la tache noire était la plus répandue et la plus grave, avec une incidence atteignant plus de 90 %. Les agents pathogènes des points noirs infectent principalement les feuilles de rose (Fig. 1). Au début de la maladie, des taches brunes apparaissent sur la face avant des feuilles, puis les taches s'élargissent progressivement en rondes ou irrégulières, elles sont brun violacé à brun foncé ; tard dans la maladie, le tissu autour des taches jaunit, les feuilles inférieures et moyennes de la plante tombent toutes, ne laissant que les quelques feuilles supérieures.

Symptômes sur le terrain et feuilles malades de la tache noire de la rose (cette image a été prise par Yanjie Li).

Dix-huit souches fongiques ont été isolées et purifiées à partir d'échantillons de feuilles malades de cinq espèces de roses différentes ("Red Leonardo da Vinci" a été isolé 4, "Sweet Pretty" a été isolé 5, "Happy Carefree" a été isolé 4, "Benita" a été isolé 2 et "Home run" a été isolé 3), ces champignons appartiennent principalement au genre Gnomoniopsis, Alternaria et Nigrospora après extraction de l'ADN, amplification et séquençage ITS, et comparaison préliminaire au NCBI. Tous les champignons ont été inoculés séparément sur les feuilles de rose saines ex vivo en laboratoire, et certaines feuilles ont commencé à montrer des symptômes vers 5 jours, parmi lesquelles les feuilles de rose saines inoculées avec les souches d'Alternaria et de Gnomoniopsis sp. présentaient les symptômes les plus évidents (tableau 4), tandis que les autres souches ne présentaient presque aucun symptôme dans les feuilles ex vivo après 7 jours d'inoculation. TMR3-3 (isolé de "Sweet Pretty") du genre Gnomoniopsis et KLWY1-6-2 (isolé de "Happy Carefree") du genre Alternaria, qui ont causé des taches noires sur des feuilles de rose saines ex vivo ont été sélectionnés comme souches représentatives pour l'inoculation dans les feuilles vivantes et des symptômes de taches noires sont apparus sur les feuilles vers 7 jours (tableau 5). Les parties pathogènes des feuilles de rosier inoculées ont été à nouveau isolées et la même méthode d'identification que les souches d'origine a été utilisée. Les souches finales obtenues pourraient toutes correspondre aux souches d'origine, donc TMR1-1-2, HSDFQ3-7-1, HSDFQ2-4, DDBX2-13, KLWY1-6-2 ; XP1-6, TMR3-3 sont tous des champignons pathogènes qui infestent la tache noire du rosier.

Cinq souches : TMR1-1-2 (isolé de "Sweet Pretty"), HSDFQ3-7-1、HSDFQ2-4 (isolé de "Red Leonardo da Vinci"), DDBX2-13 (isolé de "Benita"), KLWY1- 6-2 (isolé de "Happy Carefree") d'Alternaria sp. ont été incubés sur du milieu PDA à 25 °C pendant 7 à 10 jours. La morphologie et la couleur étaient cohérentes, les colonies initiales étant blanc grisâtre sur le devant, puis virant progressivement au brun grisâtre et au brun noirâtre sur le dos, et les colonies se développant sur toute la boîte de Pétri pendant environ 10 jours (Fig. 2A, B) . DDBX2-13 a été sélectionné comme souche représentative et observé au microscope, les conidies étaient enchaînées, ovales, en forme de poire inversée ou claviformes inversées, brunâtres, avec 0–3 septa longitudinaux, 2–5 septa transversaux, légèrement rétrécis à la séparation , individu à bec court colonnaire, la taille des spores était de (12,1–41,0) μm × (7,0–19,0) μm; le pédoncule conidial était dressé ou recourbé, cespiteux, avec des branches ; le mycélium était vigoureux et velouté, incolore, non cloisonné et d'environ (2, 1–3, 0) μm de diamètre (Fig. 2C, D). Ces champignons pathogènes ont été initialement identifiés comme appartenant au genre Alternaria sur la base de caractéristiques morphologiques14. Deux souches fongiques : XP1-6 (isolée de « Home run »), TMR3-3 (isolée de « Sweet Pretty ») du genre Gnomoniopsis ont été cultivées à une température constante de 25°C en milieu PDA, et les caractéristiques morphologiques ont également été cohérent. Ils ont poussé dans un anneau, le mycélium initial est d'un blanc pur, puis l'anneau interne du mycélium devient progressivement gris-vert, l'anneau du milieu est vert clair, l'anneau le plus externe est gris-blanc; plus tard l'ensemble de la colonie est gris-vert, le mycélium aérien est clairsemé, et enfin l'ensemble de la colonie est annulaire et produit un grand nombre de conidiophores à base gris-vert à noir, la conidie est jaunâtre lorsqu'elle déborde ; (Fig. 3A, B); la conidie est fusiforme, transparente sans septum, la surface est lisse, avec des gouttelettes, avec des gouttelettes, des spores (7,5–10 × 3,5–4) μm ; les cellules productrices de spores sont en forme de bouteille ou clavées, dégénérées à partir du pédoncule conidien, transparentes, lisses, à pointe plus fine que le fond (Fig. 3C, D).

Morphologie des colonies et des spores d'Alternaria alternata. A. alternata se développe sur un milieu PDA pendant 7 jours ((A) avant, (B) arrière). L'ascocarpe sous microscope anatomique a été cultivé pendant 7 jours (C, D).

La morphologie des colonies et des spores de Gnomoniopsis rosae G. rosae se développe sur un milieu PDA pendant 7 jours ((A) avant, (B) arrière). L'ascocarpe sous microscope anatomique a été cultivé pendant 7 jours (C, D).

L'ADN génomique de cinq souches du genre Alternaria (TMR1-1-2, HSDFQ3-7-1, HSDFQ2-4, DDBX2-13, KLWY1-6-2) a été amplifié par PCR en utilisant les amorces universelles fongiques ITS1/ITS4, NS1 /NS4, LSU1Fd/LR5 ; tandis que deux souches du genre Gnomoniopsis (XP1-6, TMR3-3) ont été amplifiées à l'aide des amorces de ITS1/ITS4, EF1-728F/EF1-986R et T1/T2. Les bandes simples et claires ont été obtenues après détection électrophorétique sur des gels d'agarose à 1 %. Les produits d'amplification PCR ci-dessus ont été envoyés à la succursale de Kunming de Beijing DynaScience Biotechnology Co., Ltd. pour séquençage, et les résultats de séquençage ont été téléchargés sur le site Web du NCBI pour obtenir les numéros d'enregistrement (Figs. 4, 5). L'arbre phylogénétique a été construit en utilisant la méthode du maximum de vraisemblance avec le logiciel MEGA11.0, et les résultats ont montré que les souches : DDBX2-13, KLWY1-6-2, HSDFQ3-7-1, TMR1-1-2 et HSDFQ2-4 regroupées dans une branche avec Alternaria alternata (Fig. 4) ; XP1-6, TMR3-3 regroupés dans une branche avec Gnomoniopsis rosae (Fig. 5). Enfin, combinés à l'identification des caractéristiques morphologiques, Alternaria alternata et Gnomoniopsis rosae ont été identifiés comme le champignon pathogène de la tache noire du rosier.

L'arbre phylogénétique à vraisemblance maximale à partir de l'ensemble de données combiné LSU, SSU et ITS d'Alternaria alternata et de ses espèces apparentées fermées (les numéros d'accession des gènes LSU, SSU et ITS sont indiqués entre parenthèses dans cet ordre).

L'arbre phylogénétique à vraisemblance maximale de l'ensemble de données combiné TEF1, TUB et ITS de Gnomoniopsis rosae et de ses espèces apparentées fermées (les numéros d'accession des gènes TEF1, TUB et ITS sont indiqués entre parenthèses dans cet ordre).

Dans cette étude, dix-huit souches fongiques morphologiquement distinctes ont été isolées des échantillons de feuilles avec des taches noires de cinq variétés de roses ("Red Leonardo da Vinci", "Sweet Pretty", "Happy Carefree", "Benita" et "Home run"), grâce à l'identification morphologique, l'identification par biologie moléculaire combinée à la règle de Koch, un total de sept souches pathogènes de points noirs ont été obtenues. Le mycélium, la structure sporulée, les conidies et autres structures de ces sept souches pathogènes ont été observés morphologiquement au microscope 40× ; l'ADN pathogène a été extrait et séquencé par amplification PCR à l'aide des amorces universelles fongiques ITS, SSU, LSU, TEF1 et TUB, et l'arbre phylogénétique a été construit par comparaison de séquences NCBI et téléchargement de l'association multigène de la souche de modèle dans GenBank, et enfin TMR1 -1-2, HSDFQ3-7-1, HSDFQ2-4, DDBX2-13 et KLWY1-6-2 ont été identifiés comme Alternaria alternata ; XP1-6 et TMR3-3 ont été identifiés comme Gnomoniopsis rosae.

La plupart des résultats des études précédentes sur la maladie des points noirs du rosier ont montré que le champignon pathogène était Marssinina rosae, ce qui était différent des résultats de nos recherches. Peihong Fang et al. ont trouvé que les champignons pathogènes de la tache noire du rosier étaient Alternaria sp, sur des plaques PDA, les colonies ont commencé comme blanc grisâtre et sont progressivement devenues noires ou brunes, et les conidies étaient cloisonnées, ovales, en forme de poire ou en forme de bâtonnet15, ce qui était cohérent avec le morphologie d'A. alternata dans cette étude. L'autre champignon pathogène, Gnomoniopsis rosae, isolé et identifié dans cette étude, n'a pas été signalé sur la tache noire du rosier. existe également des différences dans les espèces d'agents pathogènes des points noirs.

G. rosae a été signalé pour la première fois comme nouvelle espèce record en Chine par Ning Jiang et al.16, qui ont également signalé que la rose était un nouvel hôte record pour G. rosae. Cependant, c'était différent de notre recherche, G. rosae a été isolé à partir de branches saines de la rose par Ning Jiang et al. et utilisé comme champignon endophyte pour des études ultérieures sur l'identification et la caractérisation des espèces du genre Gnomoniopsis. Dans cette étude, G. rosae a été isolé des échantillons de feuilles avec des taches noires de deux variétés de roses ("Sweet Pretty" et "Home run", qui ont été vérifiées par la règle de Koch et identifiées par la morphologie et la biologie moléculaire, et finalement identifiées comme la champignons pathogènes de la maladie des points noirs du rosier. Les hôtes du champignon Gnomoniopsis spp. sont principalement des plantes des familles Crustaceae et Rosaceae, et 25 espèces de Gnomoniopsis ont été signalées, dont dix espèces sont réparties en Chine, neuf espèces ont été signalé sur des plantes de la famille des Crustaceae, et un a été signalé sur R. chinensis de la famille des Rosaceae 11. Plusieurs espèces de Gnomoniopsis spp. ont été signalées comme d'importants agents pathogènes des plantes 17, 18. Gnomoniopsis daii a été signalé comme l'agent causal de la pourriture tachetée et solide du châtaignier chinois19,20, Gnomoniopsis fragariae a causé la maladie des taches foliaires du fraisier21, Gnomoniopsis chinensis a causé une grave maladie ulcéreuse du châtaignier à Hebei, causant de graves pertes économiques localement22, Gnomoniopsis clavulata a causé la tache foliaire du chêne blanc et du gui rouge en Amérique du Nord23 , Gnomoniopsis smithogilvyi a provoqué une grave pourriture solide du châtaignier européen en Europe, en Australie et en Inde24,25,26.

Dans cette étude, un nouveau champignon pathogène de la tache noire de la rose, Gnomoniopsis rosae, qui appartient au phylum Ascomycota, à l'ordre des Diaporthales, à la famille des Gnomoniaceae et au genre Gnomoniopsis, a été identifié pour la tache noire de la rose. Il s'agit du premier signalement de G. rosae causant la tache noire de R. chinensis. Les résultats de l'identification peuvent fournir une base de référence pour d'autres recherches et le contrôle de la tache noire du rosier (Informations supplémentaires).

Les données qui appuient les conclusions de cette étude sont librement disponibles dans le matériel supplémentaire de cet article.

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Cette étude a été financée par Key Laboratory Forest Resources Conservation and Utilization in the Southwest Mountains of China, Ministry of Education; Laboratoire clé d'alerte et de contrôle des catastrophes forestières dans les universités de la province du Yunnan, Université forestière du sud-ouest. et a été soutenu par le National Key R&D Program of China (2018YFD1000407) ; la Fondation pour la recherche scientifique du Département provincial de l'éducation du Yunnan (subvention n° 2023Y0749).

Centre de recherche en ingénierie de la province du Yunnan pour les ressources florales fonctionnelles et l'industrialisation, Centre de recherche du sud-ouest pour l'ingénierie de l'architecture paysagère (Administration nationale des forêts et des prairies), Province du Yunnan Asie du Sud et du Sud-Est Centre conjoint de R&D de la forêt économique Chaîne industrielle complète Laboratoire clé d'alerte et de contrôle des catastrophes forestières en Universités de la province du Yunnan, Université forestière du sud-ouest, Kunming, 650224, Yunnan, Chine

Yanjie Li, Meiying Pu, Yusi Cui, Ju Gu, Xi Chen, Louqin Wang et Chao Wang

Collège de paysage et d'horticulture, Université agricole du Yunnan, Kunming, 650201, Chine

Hongzhi Wu

Kunming Yang Chinese Rose Gardening Co., Ltd, Kunming, 650503, Yunnan, Chine

Yuyong Yang

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Tous les auteurs ont examiné le manuscrit.

Correspondance à Chao Wang.

Les auteurs ne déclarent aucun intérêt concurrent.

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Réimpressions et autorisations

Li, Y., Pu, M., Cui, Y. et al. Recherche sur l'isolement et l'identification de la maladie des points noirs de Rosa chinensis à Kunming, Chine. Sci Rep 13, 8299 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-35295-1

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Reçu : 21 décembre 2022

Accepté : 16 mai 2023

Publié: 23 mai 2023

DOI : https://doi.org/10.1038/s41598-023-35295-1

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